细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的作用。

 

细胞冻存技术作为一种保存细胞的有效方法，在生物学领域已有深入广泛的应用。因为正常情况下，直接冷冻细胞会产生冰晶对细胞造成伤害，从而导致细胞死亡。所以需要通过添加冷冻保护剂配制细胞冻存液，来保护细胞。

 

常用的细胞冻存液通常为胎牛血清中添加10％二甲基亚砜(DMSO)，二甲基亚砜(DMSO)，可以减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性，可以很好地在细胞冻存过程中保护细胞。

 

操作使用：

 

1、按照常用方法悬浮细胞或贴壁细胞收集于离心管中。

 

2、1000rpm-1500rpm，5min离心，弃上清液。

 

3、加入适量的Serum-Free细胞冻存液于离心管中，推荐细胞冻存浓度为 1×106 - 1×107 cells/ml。缓慢混合均匀，制成细胞悬液。

 

4、将离心管中的细胞混合液分装于已标示*的冷冻保存管中。

 

5、直接将冻存细胞放入-80℃冰箱，24h后转入移至-196℃液氮罐长期冷冻保存。